500bp 為加亮帶，濃度為其他條帶的 2.5 倍；5ul 產(chǎn)品中，每條帶含量約 50ng，加亮帶約 125ng。

使用含有 EB 的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳檢測(cè)時(shí)， 將溴酚藍(lán)的條帶電泳到約 2/3 的距離時(shí)即可，否則小片段部分由于 EB 脫離 DNA，會(huì)導(dǎo)致條帶變暗。

隨附 5x Loading buffer 可用于檢測(cè)樣品時(shí)使用。

如何選擇合適的Marker?

電泳時(shí)的Marker需要根據(jù)你電泳條帶的大小來(lái)選擇。比如你是100bp左右，則應(yīng)選擇含有這個(gè)條帶的Marker，

如10-200的Marker（舉例）。當(dāng)然Marker的條帶越多，可以更準(zhǔn)確的判斷你電泳條帶的大小。

100bp DNA Ladder可能是最小的為100bp，但不同公司的可能具體條帶不一樣，可以先參考說(shuō)明書，

確認(rèn)范圍中是有包含的條帶大小。

主要考慮到marker條帶的大小和你的目標(biāo)條帶的關(guān)系,盡量選擇目標(biāo)條帶接近分子量的marker,或是在目標(biāo)分子量附近條帶較多的marker.

同時(shí)如果目標(biāo)分子量很小,凝膠通常選擇的濃度較大,就不能用分子量太大的marker,例如,只檢測(cè)200bp的條帶,那么用分子量最大到1000,或者500的marker就比較合適.

如果分子量很大,例如在幾 K ,就可能要選擇lamda HindIII這樣最大到23K的marker.否則凝膠濃度不合適,marker條帶分不開,影響對(duì)你目標(biāo)分子分子量的判斷.

DNA Marker 是分子量不同的段，主要用途就是DNA 分子凝膠電泳時(shí)，加樣用做對(duì)比來(lái)檢測(cè)瓊脂糖凝膠是否有問(wèn)題。

通過(guò)其大小可以粗略估算樣品DNA分子量的大小。

現(xiàn)在常用的DNA MARKER有兩種，一種是病毒等DNA經(jīng)過(guò)酶切獲得的，分子量大小有零有整，另外一種是固定數(shù)值的，比如100bp，

200bp等。

如果你手頭有任何一個(gè)載體，而且它的序列完全清楚，那么可以采用PCR的方法獲得一系列大小不同的片段，

比如上游引物可以使用一個(gè)，然后用數(shù)數(shù)的方法確定下游100bp處的下游引物，擴(kuò)增出的就是100bp的片段，200bp處的引物就是

200bp的片段，依此類推，可以獲得一系列不同大小的片段，擴(kuò)增后，把它們放到一起，就能獲得自制的Marker。