RNA 高效保存液（RNAwait）是一種無毒的可直接使用的樣品儲(chǔ)存液，

 

能使細(xì)胞內(nèi)的 RNA 與 RNA 酶分離，可以快速可靠地保存動(dòng)物組織、細(xì)胞內(nèi)的 RNA。

組織獲取后立即浸 入 RNAwait 保存液中，在室溫可以保存 7 天，4℃可以保存 4 周，

 

-20℃、-80℃標(biāo)本可以長(zhǎng)期保存，RNA 穩(wěn)定存在不降解，

 

取出后用各類方法抽提可以獲得高質(zhì)量的 RNA

 

15–25°C，保質(zhì)期 2 年。

 

低溫條件下有結(jié)晶析出時(shí)加熱至 37°C 溶解后使用

 

注意事項(xiàng)：

1、組織和細(xì)胞取材速度要快，在獲取后應(yīng)當(dāng)盡快浸入 RNAwait，以防止 RNA 降解。

2、冰凍組織不能用 RNAwait 保存，因?yàn)?RNAwait 不能有效滲入冰凍組織。

3、保存樣品的 RNA 提?。簶颖緩?20℃或-80℃冰箱取出后，復(fù)溫到室溫后，取出組織塊，再用于提取 RNA。

   細(xì)胞樣本則復(fù)溫后低速離心收集細(xì)胞，去除 RNAwait，再用于提取 RNA。

   后繼的處理（如組織勻漿）可以在室溫下進(jìn)行，不必在液氮中操作，RNA 仍能有效 得到保護(hù)。

   殘留少量 RNAwait 保存液不影響后繼提取 RNA 的質(zhì)量。

4、RNAwait 在動(dòng)物組織（如大鼠肝臟，脾臟）和細(xì)胞（如 DH5α）RNA 的保護(hù)中效果 不錯(cuò)；

   植物材料種類繁多，沒能一一測(cè)試(煙草和擬南芥葉片中的 RNA 能被 RNAwait 有效 保護(hù))，建議預(yù)實(shí)驗(yàn)后再使用，

適用范圍 :

●新鮮組織（動(dòng)，植物）；培養(yǎng)細(xì)菌，全血，血液

●需提采集多個(gè)樣本，且采集時(shí)間、空間跨度較大； 

●不方便馬上提取 RNA而又沒有液氮或超低溫冰箱保存樣品； 

●室溫下或只用冰的條件下長(zhǎng)途運(yùn)輸樣品。

 

操作流程：

1、根據(jù)要保存的各樣本的體積，計(jì)算出所需 RNAwait 用量。RNAwait 的用量應(yīng)當(dāng)是組 織體積的 10 倍（100 mg 組織約用 1ml RNAwait）；

離心收集 2×10 7細(xì)胞 RNAwait 的用量是 1ml。

加入 RNAwait 的原則是：量寧多勿少。

建議在實(shí)際操作中不要稱量組織，而直接根據(jù)目測(cè)結(jié)果加入 RNAwait 量，以加快操作和減少污染。

例如 5mm 邊長(zhǎng)的立方體組織塊，體積為 125mm3=125µl，故應(yīng)當(dāng)加入 1.25ml 的 RNAwait 液。

2、將 RNAwait 按需要量分裝入自備保存管中；

3、快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm 的任意片狀，較小的組織直接取下，立即完全浸 入 RNAwait 中。

注：組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則 RNAwait 不能有效滲入，組織中間部位的 RNA 不能受到保護(hù)。

較大的組織可以切成厚度<0.5 cm 的任意片狀后保存，較小的組織

（如 大鼠的腎臟、脾臟，小鼠的大部分器官）則可以直接浸入 RNAwait。

4、保存時(shí)先將樣本浸入 RNAwait 后置 4℃冰箱過夜

（注：4℃過夜是必需的，這樣可 使 RNAwait 完全滲入到組織中），

然后轉(zhuǎn)移到-20℃冰箱（RNAwait 在-20℃時(shí)仍為液態(tài)， 如有結(jié)晶析出，也是正常情況）；

或者在 4℃冰箱過夜后，從 RNAwait 中取出組織塊，將組織塊轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱。

在 RNAwait 中保存的標(biāo)本，反復(fù)凍融至室溫 20 次不影響 RNA 的 質(zhì)量